血清C反应蛋白荧光免疫层析检测方法的建立

作者：葛宇新; 丁秋雨; 钟晓骝; 栗慧超; 刘倩; 史新宇; 赵晶晶; 于源华; 张昊

来源：长春理工大学学报(自然科学版), 2016, 39(06): 129-133.

• C反应蛋白
• 量子点
• 荧光免疫层析
• 定量检测

针对人体急性炎症反应的快速检测,建立了基于量子点碲化镉(Cd Te)的荧光免疫层析分析方法及快速定量检测卡,实现血清中炎症标志物C反应蛋白(CRP)的快速定量检测。该检测卡采用双抗体夹心法,首先利用酶联免疫方法筛选出CRP测定最佳包被抗体与标记抗体,然后通过N-羟基琥珀酰(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)共价偶联法,将Cd Te量子点与CRP鼠源单克隆抗体偶联,制备抗体荧光标记物,同时优化不同条件下单克隆抗体与Cd Te量子点的偶联效果,琼脂糖凝胶电泳进行鉴定,进而构建CRP荧光免疫层析检测卡,通过建立量子点荧光强度与CRP标准品浓度之间的定量关系,从而实现人体血清中CRP的定量检测。结果表明,CRP检测卡定量检测线性范围为0.11000ng/ml,临床样本测试结果显示与进口试剂具有良好的相关性。因此研究为急性炎症反应的快速诊断,及荧光免疫层析检测卡的研发提供了技术基础。

• 单位
  生命科学技术学院; 长春理工大学