摘要
本研究旨在对维氏气单胞菌ompH基因编码蛋白(OmpH)进行生物学特性分析,预测其B细胞以及T细胞优势抗原表位,并对该基因进行克隆、原核表达、分析其表达产物的免疫原性。结果显示,维氏气单胞菌ompH基因全长513 bp,编码的蛋白有跨膜区,为亲水性外膜蛋白,二级结构主要为α-螺旋;抗原表位预测结果显示OmpH蛋白的B细胞潜在优势抗原肽段为112-114位氨基酸,含有7个辅助性T细胞(Th)表位及6个细胞毒性T细胞(CTL)表位;构建E.coli pColdTF- ompH原核表达菌株,成功表达OmpH蛋白,最佳诱导时间为24 h,最佳诱导剂终浓度为1.0 mmol/L;Western-blot 分析结果显示重组菌诱导后表达的OmpH蛋白可以被兔抗OmpH蛋白血清识别,表明OmpH蛋白具有良好的免疫原性。
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