含aFGF基因的植物表达载体的构建及其对根瘤农杆菌的转化

作者：庞实锋; 李校堃

来源：贵阳医学院学报, 2006, (04): 301-304.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2006.04.004

• 成纤维细胞生长因子1
• 植物,基因修饰
• 基因表达
• 根瘤菌属
• 生物反应器

目的:构建携带人类酸性成纤维细胞生长因子基因(haFGF)的植物表达载体,并将其转化进根瘤农杆菌中。方法:采取目的基因改造及载体构建的方法,以期构建高效表达载体。首先,采用植物偏好的密码子重新合成全长的haFGF,其次引入对目的基因表达有一定促进作用的表达调控元件:Ω序列、Kozak序列及KEDL内质网定位序列;将构建的携带haFGF的表达载体,利用冻融法将目的基因转化进根瘤农杆菌中;将构建的基因载体进行PCR鉴定、酶切分析及DNA测序鉴定。结果:DNA测序结果表明重新设计合成的基因与预期结果一致,PCR和酶切鉴定结果证实了haFGF植物表达载体构建和转化成功。结论:获得了携带haFGF的根瘤农杆菌菌株,为日后转基因植物工作奠定了一定的基础。

• 单位
  广东医科大学; 吉林农业大学