PTD-p53融合蛋白调控肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的研究

作者：杨宇; 薛秀琼; 张露含; 陈晓芳; 王元元; **; 郝军莉^*

来源：成都医学院学报, 2020, 15(06): 685-689.

• 原核表达
• PTD-p53
• 细胞形态
• 细胞克隆
• 细胞凋亡

目的探究PTD-p53融合蛋白进入肝癌细胞,调控HepG2细胞增殖与凋亡的生物学功能。方法构建pET28a-PTD-p53原核重组载体,表达具有进入细胞能力的PTD-p53融合蛋白。SDS-PAGE电泳检测融合蛋白质量分数和特异性;蛋白质印迹技术检测融合蛋白跨膜能力;细胞形态学观察和流式细胞仪分析PTD-p53融合蛋白对肝癌细胞HepG2凋亡水平的影响;细胞克隆实验探讨PTD-p53融合蛋白对HepG2细胞的增殖调控。结果大肠杆菌表达的PTD-p53融合蛋白主要位于包涵体中,复性后的PTD-p53能够以浓度梯度方式进入HepG2细胞,细胞形态学观察和流式细胞仪检测结果表明,PTD-p53融合蛋白处理促进HepG2细胞凋亡;细胞克隆实验显示终质量浓度为1mg/L或2.5mg/L的PTD-p53处理HepG2细胞,以剂量依赖方式抑制HepG2细胞克隆形成。结论 PTD-p53融合蛋白可以进入肝癌细胞,促进HepG2细胞凋亡,抑制细胞增殖,为进一步体内验证PTD-p53融合蛋白抑制肿瘤的效果奠定基础。

• 单位
  成都医学院