摘要

目的:根据前期对愤怒模型大鼠基因芯片研究,构建大鼠5-HTR2C过表达海马神经元,研究白香丹胶囊及君药白芍提取物对5-HTR2C及PKCα/β2的影响,为阐明白香丹胶囊调整愤怒情绪的作用机制提供科学依据。方法:采用基因工程技术,构建5-HTR2C真核表达载体,应用电转染技术,使5-HTR2C在大鼠原代神经元中过量表达,建立5-HTR2C体外高表达的细胞模型,结合中药血清药理学,制备白香丹胶囊和白芍提取物的含药血清,以氟西汀为阳性对照药,干预转染后的神经元,提取各组蛋白后,Western-blot技术检测5-HTR2C及PKCα/β2中相应基因的蛋白表达。结果:与正常组相比,5-HTR2C转染组中5-HTR2C的蛋白表达显著升高(P <0. 001),PKCα的蛋白表达显著下降(P <0. 001),P-PKCα的蛋白表达显著升高(P <0. 001),PKCβ2的蛋白表达显著下降(P <0. 001),P-PKCβ2的蛋白表达显著升高(P <0. 001);与5-HTR2C过表达组相比,白香丹、白芍提取物及氟西汀干预组中5-HTR2C的蛋白表达均显著下调(P <0. 01,P <0. 01,P <0. 05),PKCα的蛋白表达均显著上调(P <0. 05,P <0. 01,P <0. 01),P-PKCα的蛋白表达显著下降(P <0. 001,P <0. 01,P <0. 05),PKCβ2的蛋白表达均显著上调(P <0. 001,P <0. 01,P <0. 05),PPKCβ2的蛋白表达显著下降(P <0. 001,P <0. 001,P <0. 01)。结论:白香丹胶囊能够调整5-HTR2C高表达引起的PKCα/β2及其磷酸化水平的异常变化,且作用比氟西汀稍强,充分显示了整体调节的优势。但是,作为其中主要组分的白芍提取物无显著的调节作用,推测白香丹胶囊其他组分-香附酮及丹皮酚在愤怒致病治疗中也有一定的作用,需进一步研究。

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