等温扩增技术概述及其在动物病原检测中的应用

作者：禹兰平; 王楷宬; 潘俊慧; 张富友; 杨文静; 周凯钰太; 崔成都; 孙福亮; 王素春^*

来源：中国动物检疫, 2022, 39(12): 96-103.

• 等温扩增技术
• 动物病原检测
• 研究进展

等温扩增技术是一种可以在恒定温度下进行体外核酸扩增的技术，近几年其研究热度很高。本文从技术原理、优缺点及在动物病原检测应用等方面，对环介导等温扩增技术（LAMP）、重组酶等温扩增技术、依赖核酸序列扩增技术（NASBA）、交叉引物等温扩增技术（CPA）和赖解旋酶等温扩增技术（HDA）等5种常见等温扩增技术进行了综述。LAMP技术操作简单，不依赖特殊设备，但引物设计较为复杂，研发多重LAMP检测方法有很大困难。重组酶等温扩增技术不受场地条件约束，扩增时间短，但容易造成气溶胶污染，因此一般用于实验研究。NASBA技术扩增效率高，不易产生污染，但成本偏高，操作相对复杂，在目前疫病检测研究中的应用逐渐减少。CPA技术操作相对简单，灵敏度高，特异性好，但结果判断受主观因素影响易造成假阳性或假阴性。HDA技术引物设计相对简单，但反应体系较为复杂，因此不适合扩增长序列。不同的等温扩增技术需要根据实际需求和场景条件来选择。等温扩增技术作为一种新兴技术具备许多优点，但仍需要不断改进，未来与微流体芯片、纳米金、CRISPR等技术联合应用，将会实现更加快捷、准确、简便的检测，从而为动物疫病检测提供更好的服务。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心; 延边大学