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摘要
目的 构建基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)东中南非型Ross株及该型印度洋分支LR2006株的感染性克隆。方法 分别将CHIKV Ross株和LR2006株基因组分段合成,构建完整基因组的转录质粒,转录制备病毒基因组RNA,转染Vero细胞,收集培养上清,接种Vero细胞扩增病毒,用扩增的病毒感染Huh7细胞,检测病毒蛋白的表达,经滴鼻途径将106 PFU病毒接种给C57BL/6小鼠,观察小鼠的体重改变以及存活情况。结果 成功构建了2株CHIKV的全长基因组转录质粒,在RNA转染Vero细胞的上清中检测到感染性CHIKV。Ross株感染的5只小鼠在6天后体重下降(P<0.05),第11天小鼠全部死亡。LR2006株感染的5只小鼠仅1只死亡,且全部小鼠体重均无明显减轻。结论 成功构建CHIKV的Ross株和LR2006株感染性克隆,Ross株对C57BL/6小鼠致病性强于LR2006株。
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