本发明涉及药物合成技术领域,尤其是涉及一种鼠胆酸的制备方法。所述鼠胆酸的制备方法,以3α,6α-二羟基-5β-胆烷酸为原料经烷基酯化,6位、3位选择性氧化,溴化反应,取代反应,6位还原,水解得到鼠胆酸。本发明通过上述合成路线制备得到鼠胆酸,即3α,6β,7β-三羟基-5α-胆烷酸,原料来源广泛,供应充足;并且,经过上述步骤得到的鼠胆酸的产率高,可达24.5%,适合大量制备,可为后续的相关研究提供数据支持及参考。