CML28树突状细胞核酸疫苗的构建及其表达研究(英文)

作者：张东华; 周红升; 汪涯雅; 刘文励; 黄振倩; 谭获

来源：中国实验血液学杂志, 2005, (04): 631-636.

• CML28
• 树突状细胞
• 核酸疫苗

为了构建负载CML28的核酸疫苗,并在树突状细胞中进行表达,用分子克隆的方法,从K562细胞中克隆出CML28的cDNA全长,将其亚克隆至pGEM-T载体,经测序后酶切,克隆至真核表达载体pcDNA3.1HisA,将重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28进行酶切分析和测序鉴定;从正常人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),在IL-4和GM-CSF条件下诱导分化为树突状细胞(DC),并进行鉴定;用电穿孔的方法将重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28导入到DC中,WesternBlot检测His-CML28融合蛋白的表达。结果表明:经酶切分析和测序鉴定,重组质粒pcDNA3.1HisA-CML28含有正确的CML28全长序列;经电穿孔导入DC后,重组质粒能表达His-CML28蛋白。结论:成功构建了CML28树突状细胞核酸疫苗。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 广州医学院