萝卜MSAP体系优化与抽薹过程中MSAP分析

作者：柳李旺; 宋贤勇; 龚义勤; 杨金兰; 汪隆植

来源：江苏农业科学, 2006, (06): 203-206.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2006.06.073

• 萝卜
• 抽薹
• MSAP
• DNA甲基化
• 体系优化

对萝卜基因组DNA的MSAP关键步骤进行了优化并应用于抽薹过程中甲基化样式分析。研究表明,MSAP分析需要较高纯度的模板DNA,HpaⅡ/M spⅠ-EcoRⅠ酶切连接体系中可选用10×T+0.1%BSA Buffer作为通用缓冲液,适宜的酶切连接条件为37℃,4 h;预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增体系反应模板,用优化的体系可获得稳定的MSAP银染指纹图谱;在优化体系的基础上,使用18对引物分析了萝卜抽薹过程中DNA甲基化水平的变化情况,结果表明在未现蕾—现蕾—抽薹过程中基因组DNA甲基化水平先降低,随着花茎的伸长DNA甲基化水平又逐渐上升,各个时期,CCGG内侧胞嘧啶完全甲基化程度均高于...