缺氧调节肺腺癌小鼠MDSCs来源外泌体携带的miRNA及其免疫抑制功能

作者：郑玉涛; 邵烁鋆; 薛林怡; 彭辉勇; 朱栋炜^*

来源：免疫学杂志, 2023, 39(03): 192-224.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20230025

• 缺氧
• 髓源性抑制细胞
• 外泌体
• miRNA

目的 观察正常(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下，髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)来源外泌体(exosomes derived from MDSCs, MDSCs-EX)的免疫抑制功能，探究缺氧对MDSCs-EX携带miRNA成分以及免疫抑制能力的影响。方法 构建肺腺癌小鼠移植瘤模型，磁珠分选脾脏中的MDSCs，分别在21%O2和1%O2条件下培养MDSCs，提取上清中的外泌体。通过透射电子显微镜观察形态、流式检测颗粒直径、Western bolt检测特异性蛋白鉴定制备的外泌体。观察正常和缺氧条件下MDSCs-EX对CD3+T细胞增殖的影响。对正常和缺氧条件下MDSCs-EX进行miRNA测序分析，观察2者在miRNA表达上的差异，将差异表达前十位的miRNA作为待筛选miRNA。运用siRNA特异性敲减待筛选miRNA，观察缺氧条件下MDSCs-EX携带的miRNA对其免疫抑制功能的影响。结果 成功分选出肺腺癌小鼠脾脏中的MDSCs，并制备了正常和缺氧条件下的MDSCs-EX。相比正常条件下制备的MDSCs-EX，缺氧条件下MDSCs-EX对于CD3+T细胞增殖的抑制能力更强。敲减缺氧条件下MDSCs-EX中表达明显上调的miR-43-3p和Let-7c-5p,MDSCs-EX抑制CD3+T细胞增殖的能力减弱。结论 相比正常氧含量环境，缺氧条件下制备的MDSCs-EX具有更强的免疫抑制能力，这与缺氧MDSCs-EX中携带更多的miR-43-3p和Let-7c-5p相关。

• 单位
  江苏大学附属人民医院; 镇江市丹徒区人民医院; 镇江市第一人民医院; 江苏大学