CA125抗原核酸适体的筛选及鉴定

作者：黄百海; 何雷; 李保林; 修尘林; 赵运旺^*

来源：分子影像学杂志, 2019, 42(01): 52-56.

• CA125抗原
• 消减SELEX技术
• 核酸适体
• 高通量测序技术

目的建立一种基于核酸适体快速检测肿瘤血清标志物CA125抗原的方法。方法以CA125抗原为筛选靶标,CA199抗原为反筛选靶标,羧基化琼脂磁珠为筛选介质,利用指数级富集配体的系统进化技术筛选其高特异性核酸适体,利用生物信息学方法对核酸适体进行序列分析和二级结构预测,荧光定量法分析核酸适体的亲和力,ELONA法测定核酸适体的特异性。结果经过6轮消减SELEX筛选,次级ssDNA文库的亲和力逐渐提高,特异性次级ssDNA文库逐轮富集,经二代测序,获得3条拷贝数>1000的核酸序列(Apt-1、Apt-2、Apt-3),可特异性识别CA125抗原,测定Kd值,分别为41.02±4.9、19.06±9.0、10.02±5.0 nmol/L,Apt-3亲和力最高。结论功能性核酸适体Apt-3能高特异性识别CA125抗原,为肿瘤血清标志物CA125检测提供了一种新的、快速、有效的工具和手段。

• 单位
  环境与化学工程学院; 秦皇岛市第一医院; 燕山大学