科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为探究法半夏炮制过程中炮制辅料石灰水浸泡对其毒性成分凝集素蛋白的影响，阐释法半夏炮制过程中石灰水解毒的科学内涵。以Western blot法考察不同pH石灰水(pH 10、11、12.4)、饱和氢氧化钠及碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量的影响；采用SDS-PAGE法结合银染技术测定不同pH石灰水浸泡凝集素蛋白后上清与沉淀中蛋白组成；以MALDI-TOF-MS/MS技术检测不同pH石灰水浸泡凝集素蛋白后上清及沉淀中肽段相对分子质量分布，圆二色谱检测浸泡过程中凝集素蛋白二级结构比例变化。结果显示，pH>12的石灰水及饱和氢氧化钠溶液浸泡均可使凝集素蛋白含量显著下降，而pH<12的石灰水及饱和碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量无显著影响。pH>12的石灰水浸泡凝集素蛋白后其上清和沉淀均在12 kDa位置未检测到对应的凝集素蛋白条带和分子离子峰。这是由于pH>12的石灰水浸泡可使凝集素蛋白的二级结构比例发生明显改变，出现了不可逆变性过程，而pH<12的石灰水浸泡未使凝集素蛋白的二级结构比例发生明显改变，未出现变性过程。pH>12是法半夏炮制过程中石灰水解毒的关键条件。石灰水(pH>12)浸泡可使凝集素蛋白发生不可逆变性，致使半夏致炎毒性显著下降，起到炮制解毒的关键作用。
- 单位
