人参皂苷Rg1对LPS诱导的人鼻黏膜上皮细胞凋亡及黏蛋白分泌的影响

作者：王明香; 张绍芳; 陈薇; 黄凌峰

来源：现代医学, 2022, 50(01): 15-22.

• 人参皂苷Rg1
• 脂多糖
• 人鼻黏膜上皮细胞
• 糖黏蛋白5AC
• 细胞凋亡

目的:探讨人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,GRg1)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导人的鼻黏膜上皮细胞中糖黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响，并阐明其可能的作用机制。方法:采用不同浓度LPS或GRg1处理人鼻黏膜上皮细胞HNEpC,CCK-8法检测细胞增殖活性，筛选LPS和GRg1干预浓度。采用400 ng·ml-1 LPS或40μmol·L-1 GRg1分别或同时处理HNEpC细胞，将细胞分为空白对照组(Blank组)、LPS组、LPS+GRg1组、LPS+3-MA和LPS+GRg1+3-MA组。采用ELISA法检测各组细胞上清液中MUC5AC含量；qRT-PCR检测各组细胞中MUC5AC mRNA表达水平；Annexin V/PI双染色法检测各组细胞凋亡情况；单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin, MDC)染色检测细胞自噬囊泡聚集情况；透射电镜观察细胞自噬体形成情况；Western blot检测各组细胞中MUC5AC、Beclin 1、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白表达水平。结果:与Blank组比较，LPS组细胞中MUC5AC mRNA和蛋白表达水平以及上清液中MUC5AC含量均显著上升(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),细胞自噬水平增加，自噬相关蛋白Beclin 1表达水平和LC3Ⅱ/Ⅰ值均显著升高(P<0.01);与LPS组比较，LPS+GRg1组和LPS+3-MA组细胞中MUC5AC mRNA和蛋白表达水平以及上清液中MUC5AC含量均显著下降(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),细胞自噬水平降低，自噬相关蛋白Beclin 1表达水平和LC3Ⅱ/Ⅰ值均显著降低(P<0.01);与LPS+3-MA组比较，LPS+3-MA+GRg1组细胞以上各项指标均无显著性变化(P>0.05)。结论:人参皂苷Rg1可抑制LPS诱导的人鼻黏膜上皮细胞MUC5AC高表达，并同时抑制细胞凋亡，其机制可能与抑制细胞自噬有关。

• 单位
  郴州市第一人民医院