阻断半乳糖凝集素-受体相互作用对弓形虫感染小鼠小肠免疫病理的影响

作者：欧阳然; 刘星卓; 黄世光; 吕芳丽^*

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2023, 41(03): 279-285.

• 弓形虫
• 感染小鼠
• 小肠
• 半乳糖凝集素

目的探讨半乳糖凝集素与受体的相互作用对弓形虫感染小鼠小肠免疫病理的调节作用。方法 将18只雌性BALB/c小鼠随机分成4组：未感染组(naive组) 4只、α-乳糖组(lactose组) 4只、弓形虫感染组(Tg组) 5只和弓形虫感染+lactose组(Tg+lactose组) 5只。Tg组和Tg+lactose组每鼠腹腔注射约1 000个弓形虫速殖子，naive组和lactose组腹腔注射PBS 0.2 ml。感染后当天开始，Tg+lactose组和lactose组每鼠腹腔注射0.2 mol/L的lactose 0.2 ml,naive组和Tg组每鼠腹腔注射等体积的PBS，早、晚各1次，连续注射7 d。感染弓形虫后，记录各组小鼠的生存时间。在感染后第7天处死小鼠，取空肠中段进行石蜡切片和HE染色，观察小鼠小肠组织的病理变化；取小鼠空肠下段提总RNA后逆转录，以β肌动蛋白(β-actin)作为内参基因，qRT-PCR检测小鼠小肠组织弓形虫表面抗原1 (SAG1)、半乳糖凝集素3 (galectin-3)、 galectin-9、T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3 (Tim-3)、白细胞分化抗原137 (CD137)、白细胞介素12 (IL-12)、 γ-干扰素(IFN-γ)、IL-10、IL-4、转化生长因子β (TGF-β)、趋化因子受体2 (CCR2)、和几丁质酶3样分子3 (Ym1)的mRNA相对表达水平。结果感染弓形虫后，naive组和lactose组小鼠无死亡，Tg组小鼠的存活时间为182～188 h, Tg+lactose组小鼠的存活时间为180～182 h；两组小鼠的生存时间差异有统计学意义(χ2=19.52, P <0.05)。HE染色结果显示，naive组和lactose组小鼠的空肠组织未观察到炎症改变；Tg组和Tg+lactose组小鼠的小肠组织观察到肠绒毛缩短，肠隐窝变浅，绒毛顶端上皮细胞坏死，小肠黏膜组织中有炎症细胞浸润。与Tg组的相比，Tg+lactose组小鼠小肠组织的病理损伤更加严重。qRT-PCR结果显示，Tg+lactose组小鼠小肠组织SAG1的mRNA相对表达水平为9.17±1.65，高于Tg组的1.00±0.84 (t=4.40,P <0.05)。naive组、lactose组、Tg组和Tg+lactose组小鼠小肠组织galectin-3的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.28、1.71±0.31、2.46±1.11和7.10±1.57 (F=10.15,P <0.01),galectin-9的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.31、1.44±0.26、3.21±1.01和7.00±1.08 (F=14.53,P <0.01),Tim-3的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.12、0.88±0.28、1.64±0.31和4.89±0.69 (F=19.15,P <0.01),CD137的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.42、1.03±0.30、0.89±0.11和3.84±0.77 (F=8.46,P <0.01),IL-12的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.35、1.14±0.56、12.37±4.43和18.42±3.89 (F=10.18,P <0.01),IFN-γ的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.56、1.65±0.53、5.57±1.84和21.26±6.48 (F=10.38,P <0.01),IL-10的mRNA相对表达水平分别为1.00±0.20、1.10±0.25、8.65±2.52和21.98±3.96 (F=20.84,P <0.01)。小鼠小肠组织中IL-4、TGF-β和CCR2的mRNA相对表达水平在naive组、lactose组、Tg组和Tg+lactose组之间差异无统计学意义(F=1.09、4.74、2.03，均P> 0.05)。naive组和lactose组未检测到Ym1的mRNA表达，Tg组和Tg+lactose组Ym1的mRNA相对表达水平差异无统计学意义(t=0.24,P> 0.05)。结论 阻断半乳糖凝集素-受体相互作用后，弓形虫感染小鼠的小肠组织虫荷增加、病理损伤加重，galectin-3、galectin-9、Tim-3、CD137、IL-10和IFN-γ的表达上调。

• 单位
  中山大学; 暨南大学; 中山大学中山医学院