雷公藤甲素通过抑制CCL2-CCR2信号通路调节黑色素瘤细胞的增殖、凋亡和免疫逃避

作者：杨羽; 黎官印; 陈颖; 赵菊花^*

来源：中国煤炭工业医学杂志, 2023, 26(05): 449-455.

• 雷公藤甲素
• 黑色素瘤
• 增殖
• 凋亡
• 免疫逃避
• CCL2-CCR2信号通路

目的 探讨雷公藤甲素(TP)通过抑制趋化因子配体2(CCL2)-趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)信号通路调节黑色素瘤(Mel)细胞的增殖、凋亡和免疫逃避。方法 将A375细胞分为对照组(未做任何处理的A375细胞)、L-TP组(10nM TP处理A375细胞)、M-TP组(20nM TP处理A375细胞)、H-TP组(40nM TP处理A375细胞)、Bindarit组(300μM CCL2-CCR2信号通路抑制剂Bindarit处理A375细胞)、H-TP+GW0742组(1.0μM CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742和40nM TP共同处理A375细胞)；CCK8法检测A375细胞增殖；流式细胞术检测A375细胞凋亡；Transwell法以及伤口愈合试验检测A375细胞侵袭和迁移；ELISA法检测干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；Western blot检测通路蛋白以及凋亡相关蛋白表达。结果 与对照组比较，L-TP组、M-TP组、H-TP组、Bindarit组OD值、迁移率、侵袭细胞数量、Bcl-2、CCL2、CCR2、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)蛋白水平、CD8+T细胞的凋亡率、IFN-γ、TNF-α水平均显著下降(P<0.05)，凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平均显著上升(P<0.05)；与H-TP组比较，H-TP+GW0742组OD值、迁移率、侵袭细胞数量、Bcl-2、CCL2、CCR2、PD-L1蛋白水平、CD8+T细胞的凋亡率、IFN-γ、TNF-α水平均显著升高(P<0.05)，凋亡率、Bax、cleaved-Caspase-3蛋白水平均显著下降(P<0.05)。结论 TP可能通过下调CCL2-CCR2通路，抑制A375细胞增殖、侵袭、迁移和免疫逃避，促进A375细胞凋亡。

• 单位
  南充市中心医院; 川北医学院; 第二临床医学院