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摘要
目的 :从大容量抗体库中淘选全人源化抗乙型肝炎病毒 Pre S1的单链抗体。方法 :以 6 0例健康供者的外周血淋巴细胞为来源 ,构建了 10 1 0人源天然单链抗体库 ,并以 Pre S1抗原肽进行淘选。 3轮淘选后 ,单克隆经 EL ISA检测 ,富集的特异性单克隆经 E.coli HB2 15 1表达后进行 Western检测并测序。结果 :3轮淘选之后 ,噬菌体的投入 /产出比提高了 10 0倍。抗原抗体反应结果显示 ,A4 1 0 =1.0的抗 Pre S1的单链抗体得到富集。Western结果显示其插入的单链抗体片段正确。该抗体基因序列的 DNAPL OT软件分析结果进一步表明该抗体是人抗体 ,其 VH 属于 VH1亚族 ,Vλ属于 Vλ1亚族。结论 :这一技术是获得全人源化抗 Pre S1的单链抗体的有效途径 ,同时为基因工程抗体用于临床治疗乙型肝炎奠定基础。
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单位吉林大学第一医院
