科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
探索清开灵口服制剂清热解毒、镇静安神作用的“成分-靶标-功效”网络调控机制。通过选取清开灵口服制剂中23个主要成分为研究对象，利用TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库预测化合物潜在作用靶点，运用UniProt数据库校准靶点基因，借助OmicsBean分析系统与STRING 10数据库对靶点进行基因本体(Gene Ontology, GO)功能富集分析和KEGG信号通路分析，利用Cytoscape 3.8.2软件进行可视化处理，构建“成分-靶标-通路-药理作用-功效”网络。对23个主要成分和15个关键靶点进行分子对接，验证其结合能力。最后采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型，验证清开灵口服制剂中6个单体成分的抗炎作用。结果发现23个目标化合物可作用于236个相关靶点，干预33条关键信号通路，主要有花生四烯酸代谢、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)信号通路、TRP通道的炎性介质调节、cAMP信号通路、cGMP-PKG信号通路、Th17细胞分化、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)信号通路、神经组织的配体-受体相互作用、钙信号通路、γ氨基丁酸能突触等，涉及抗炎及免疫调节、解热、抗惊厥等药理作用，构建了清开灵口服制剂“成分-靶点-通路-药理作用-功效”网络，分子对接结果表明活性成分与关键靶点的对接构象合理。体外细胞实验表明，清开灵口服制剂中6个单体成分(猪去氧胆酸、黄芩苷、绿原酸、异绿原酸C、表告依春、栀子苷)均能显著降低LPS诱导的RAW264.7炎性细胞上清中一氧化氮(nitric oxide, NO)、TNF-α和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)的表达(P<0.05),推测以上6个成分可能为清开灵口服制剂的关键药效物质。结果表明，清开灵口服制剂中主要化学成分猪去氧胆酸、黄芩苷、绿原酸、异绿原酸C、表告依春、栀子苷、胆酸、异绿原酸A、γ-氨基丁酸等可能通过作用于IL-6、TNF、前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2, PTGS2)、花生四烯酸5-脂氧合酶(arachidonate 5-lipoxygenase, ALOX5)、血管细胞黏附蛋白1(vascular cell adhesion molecule 1, VCAM1)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2, NOS2)、前列腺素E2受体EP2亚型(prostaglandin E2 receptor EP2 subtype, PTGER2)、γ-氨基丁酸受体α亚基(gamma-aminobutyric acid receptor subunit alpha, GABRA)、γ-氨基丁酸B型受体亚基1(gamma-aminobutyric acid type B receptor subunit 1, GABBR1)、4-氨基丁酸转氨酶(4-aminobutyrate aminotransferase, ABAT)等关键蛋白靶点，干预了多个与炎症、免疫调节、发热、惊厥等相关的生物过程，初步揭示了清开灵口服制剂的药效物质及作用机制。
- 单位
