摘要

背景与目的:前期,笔者通过生物信息学分析和验证发现miR-204-5p在甲状腺乳头状癌(PTC)中呈低表达,并可能是PTC发生发展中的关键分子。因此,本研究进一步探讨miR-204-5p对PTC细胞侵袭能力的影响及机制。方法:采用Transwell实验检测miR-204-5p过表达和敲低对PTC细胞系TPC-1细胞的侵袭能力影响;通过miRDB网站预测miR-204-5p下游靶基因,并采用Western blot实验、Transwell实验、GEPIA数据库分析及双荧光素酶报告基因实验验证。结果:Transwell实验结果显示,过表达miR-204-5p的TPC-1细胞侵袭能力明显降低,而miR-204-5p抑制的TPC-1细胞侵袭能力明显增强(均P<0.05)。miRDB网站预测显示,TNFRSF12A可能为miR-204-5p下游靶基因;Western blot结果显示,过表达miR-204-5p的TPC-1细胞TNFRSF12A表达下调,而miR-204-5p抑制的TPC-1细胞TNFRSF12A表达上调;过表达TNFRSF12A的TPC-1细胞侵袭能力明显增强,TNFRSF12A抑制的TPC-1细胞的侵袭能力明显降低;TNFRSF12A可逆转miR-204-5p对TPC-1细胞侵袭能力的影响(均P<0.05)。GEPIA数据库分析显示,TNFRSF12A在PTC组织中高表达。双荧光素酶报告基因实验结果显示,TNFRSF12A是miR-204-5p的靶基因。结论:miR-204-5p可靶向结合TNFRSF12A mRNA的3’UTR抑制TNFRSF12A的表达,而PTC细胞中miR-204-5p表达下调,削弱了其对TNFRSF12A表达的抑制,从而导致PTC细胞侵袭能力增强。