靶向抑制基因DENN-SV诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡与NF-κB的关系

作者：李锦成; 骆振华

来源：中国妇幼保健, 2014, 29(06): 953-957.

• DENN-SV
• 短发夹RNA
• RNA干扰
• 人MCF-7细胞系
• NF-
• κB

目的:研究DENN-SV基因在人乳腺癌细胞系MCF-7中抗凋亡作用的可能机制。方法:将前期试验筛选出的含最佳靶点序列的菌株扩增并抽提质粒,将实验分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组。将实验分为两组,每组分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组,一组转染后48h给予TRAIL 25 ng/ml处理4 h,另一组不予TRAIL处理。收集细胞,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,采用Elisa法测定细胞裂解液中NF-κB含量,采用EMSA法检测核蛋白样品中NF-κB活性。结果:流式细胞仪检测TRAIL诱导凋亡效果增强,与空白组、阴性对照组相比较差异具有统计学意义(P<0.05);Elisa检测NF-κB结果示实验组的NF-κB表达量显著降低差异有统计学意义(P<0.05),EMSA检测NF-κB结果示实验组的NF-κB活性减弱差异有统计学意义(P<0.05)。结论:干扰DENN-SV基因的表达后,给予TRAIL处理可引起MCF-7细胞的凋亡率增高。这种现象的机制可能与NF-κB活性有关,且该现象与NF-κB的关系与TRAIL的作用没有直接联系。

• 单位
  辽宁医学院附属第一医院