大黄素联合5AzA-cdR对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK的去甲基化作用

作者：周鸿鲲; 梅小平; 潘杰; 褚永权; 姚明; 陈亮

来源：中华胰腺病杂志, 2018, 18(03): 180-184.

• 胰腺肿瘤
• 异种移植模型抗肿瘤试验
• 大黄素
• 甲基化
• 5AzA-cdR

目的探讨大黄素是否增强5AzA-cdR对胰腺癌裸鼠移植瘤抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK的去甲基化作用。方法建立胰腺癌PANC1细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,随机将裸鼠分为对照组、大黄素组、5AzA-cdR组以及大黄素联合5AzA-cdR组(联合用药组)。观察各组移植瘤的生长情况,采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测各组移植瘤组织p16、RASSF1A、ppENK的甲基化水平,采用荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测上述3个抑癌基因mRNA和蛋白的表达量。结果对照组、大黄素组、5AzA-cdR组、联合用药组移植瘤重量分别为(0.28±0.01)、(0.17±0.01)、(0.12±0.02)、(0.08±0.01)g;体积分别为(517±0.02)、(382±0.01)、(232±0.03)、(169±0.01)mm3;p16甲基化程度为1.00±0.00、0.89±0.02、0.63±0.02、0.19±0.01;RASSF1A甲基化程度为1.00±0.00、0.88±0.02、0.51±0.01、0.32±0.01;ppENK甲基化程度为1.00±0.00、0.92±0.02、0.77±0.02、0.31±0.01;p16mRNA表达量为1.00±0.00、1.71±0.02、2.67±0.02、3.81±0.01;RASSF1A mRNA表达量为1.00±0.00、1.92±0.02、2.73±0.03、3.77±0.01;ppENK mRNA表达量为1.00±0.00、1.69±0.03、2.17±0.02、4.28±0.01;p16蛋白表达量为1.00±0.00、1.71±0.02、2.67±0.02、3.81±0.01;RASSF1A蛋白表达量为1.00±0.00、1.92±0.02、2.73±0.03、3.77±0.01;ppENK蛋白表达量为1.00±0.00、1.69±0.03、2.17±0.02、4.28±0.01。3个治疗组移植瘤的重量及体积均显著小于对照组,3个抑癌基因甲基化程度均低于对照组,抑癌基因mRNA及蛋白表达均显著高于对照组,其中联合用药组又显著强于2个单独用药组,差异均有统计学意义(P值<0.05或<0.01)。结论大黄素联合5AzA-cdR用药可增强5AzA-cdR对胰腺癌移植瘤组织抑癌基因p16、RASSF1A、ppENK的去甲基化作用。

• 单位
  嘉兴学院