尼罗罗非鱼marco基因克隆、亚细胞定位及表达分析

作者：杨观健; 汪志文; 黎源; 李炳喜; 鲁义善^*

来源：广东海洋大学学报, 2022, 42(05): 27-37.

DOI：10.3969/j.issn.1673-9159.2022.05.004

• 尼罗罗非鱼
• marco
• 无乳链球菌
• 清道夫受体
• 亚细胞定位
• 表达分析

【目的】研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)胶原样结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,Marco)的结构特征和免疫功能，为揭示尼罗罗非鱼免疫应答机制提供理论基础。【方法】采用聚合酶链式反应从尼罗罗非鱼脾脏克隆marco基因序列，利用生物信息学和亚细胞定位等手段分析其结构特征，用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其表达情况。【结果】尼罗罗非鱼marco基因(Onmarco)的开放阅读框(open reading frame,ORF)长1 071 bp，共编码356个氨基酸，具有跨膜结构域、典型的胶原样结构域和C端富半胱氨酸受体(scavenger receptor cystein-rich,SRCR)结构域；多序列比对和系统进化分析表明，Marco在硬骨鱼类中具有较高的保守性；亚细胞定位显示，尼罗罗非鱼Marco(OnMarco)在HEK-293T细胞中为全细胞分布，主要在细胞膜上表达；qRT-PCR结果显示，Onmarco在健康尼罗罗非鱼各组织中均有表达，但在血液中的表达量最高；经灭活的无乳链球菌和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激后，Onmarco在罗非鱼肠道、头肾和脾脏中的表达量均呈时序性变化；用脂多糖(LPS)、Poly I:C和灭活后的无乳链球菌刺激罗非鱼头肾白细胞，Onmarco表达量均显著升高。【结论】Onmarco基因可能在鱼体抵御细菌和病毒入侵的免疫反应中发挥重要作用。

• 单位
  广东海洋大学深圳研究院; 广东海洋大学