单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ条件敲除小鼠的繁殖和基因型鉴定

作者：郑欣洵; 张智静; 黄宝艺; 廖子君; 刘建军; 罗涛

来源：实验动物与比较医学, 2018, 38(03): 222-226.

• 单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)
• 条件性基因敲除
• Cre/loxp系统
• 单核细胞

目的构建和鉴定单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)条件性基因敲除小鼠。方法将引进的纯合子PPARγ-loxp小鼠和单核细胞特异性表达cre重组酶的Cx3cr1cre小鼠进行杂交,得到F1代,用RT-PCR方法鉴定其基因型。将F1代进行自交产生F2代,鉴定基因型,筛选实验所需的PPARγ条件性基因敲除小鼠(实验组,PPARγ-ko)及对照组小鼠(对照组,PPARγ-wt),利用免疫荧光及Western blotting方法鉴定敲除效果。结果筛选出基因型为PPARγloxp/loxp Cx3cr1cre/-和PPARγloxp/loxp Cx3cr1cre/cre的小鼠即为本实验所要构建的单核细胞PPARγ条件基因敲除小鼠,基因型为PPARγloxp/loxp Cx3cr1-/-小鼠为实验对照组小鼠。结论成功获得单核细胞PPARγ条件性基因敲除小鼠,为单核细胞上PPARγ功能的研究提供小鼠模型。

• 单位
  深圳市第二人民医院; 深圳市疾病预防控制中心; 北京大学深圳医院