摘要
目的研究氧化苦参碱对于由H2O2所致的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法建立H9c2心肌细胞氧化应激损伤模型,取对数生长期细胞,将细胞随机分成4组:1正常对照组,不加任何处理因素;2模型组:在细胞培养基中加入终浓度为200μmol/L H2O2培养6 h;3苦参碱低、高剂量组:在细胞培养基中加入低、高浓度(20、60μmol/L)的苦参碱培养12 h,再加入终浓度为200μmol/L的氧化应激继续培养6 h。采用MTT法检测细胞存活率,收集细胞上清及培养基,采用ELISA法检测丙二醛(MDA)水平及乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western blotting法检测p-AKT、AKT、p-Bad、Bad、Bcl-2、Bax蛋白。结果与正常对照组比较,模型组细胞存活率降低、调亡率升高,细胞上清液中LDH活性增强、SOD活性减弱、MDA水平升高,p-AKT、Bcl-2、p-Bad蛋白水平降低,Bax升高(P均<0.05)。与模型组比较,苦参碱低、高剂量组细胞存活率提高,凋亡率降低,细胞上清液中MDA水平降低以及LDH活性减弱,SOD活性增强,p-AKT、Bcl-2、pBad蛋白表达量升高,Bax的表达降低(P均<0.05)。结论苦参碱可以通过影响p-AKT及其下游蛋白Bad表达,对H9c2心肌细胞由H2O2引起的氧化应激损伤起保护作用。
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