荧光素酶表达载体yy625的构建及鉴定

作者：李玉洁; 霍嘉鋆; 曹后男; 金美玉; 山本義治; 赵成日

来源：分子植物育种, 2022, 1-8.

• 荧光素酶
• yy625载体
• 构建

本研究中为了构建含不同LUC报告基因的表达载体，利用TOYOBO公司pELuc(PEST)-test载体的ELuc′(PEST)基因替换yy621载体中的LUC基因，构建了yy625载体。利用PCR从pELuc(PEST)-test载体中克隆获得带有Bgl II和Xba I酶切位点的ELuc′(PEST)片段，经Bgl II和Xba I酶切后的片段插入到载体yy621的Bgl II和Xba I位点之间，替换LUC基因。经菌落筛选、PCR鉴定和测序，阳性菌落中的ELuc′(PEST)序列与载体pELuc(PEST)-test中的ELuc(PEST)序列一致，表明载体625构建成功。筛选出更加灵敏、信号强的LUC报告基因，对于研究启动子序列中包含的基因调控元件有着重要的意义。

• 单位
  延边大学