摘要
目的探讨环指蛋白43(RNF43)对类风湿关节炎-滑膜成纤维细胞(RA-FLS)分泌MMPs的影响。方法取膝关节置换术的RA患者滑膜组织, 酶消法体外培养RA-FLS, 构建RNF43慢病毒过表达质粒, 转染后利用实时荧光定量(qRT)-PCR检测转染效率。转染成功后提取细胞RNA及培养液上清, 分别通过qRT-PCR、ELISA检测MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达情况。采用独立样本t检验进行统计分析。结果当感染复数40时并加用聚凝胺可满足实验要求, RNF43的mRNA较空病毒对照组升高26 158倍。与空病毒对照组相比, RNF43过表达组MMP-1、MMP-3、MMP-13的mRNA[(0.19±0.06), t=28.314, P<0.05;(0.28±0.07), t=23.413, P<0.05;(0.21±0.09), t=18.365, P<0.05]及蛋白[(31.0±9.4)pg/ml, (17.1±2.1)pg/ml, t=3.198, P=0.029]、MMP-3[(38.7±8.1)pg/ml, (24.9±3.5)pg/ml, t=3.514, P=0.015]、MMP-13[(31.0±5.4)pg/ml, (20.6±2.9)pg/ml, t=5.632, P=0.001]均明显减少。结论 RNF43可能通过抑制Wnt信号通路活性对RA-FLS分泌MMPs起抑制作用。
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单位上海市长宁区光华中西医结合医院; 长海医院