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摘要
目的 探讨M2型巨噬细胞来源的外泌体对OVCAR-3人上皮性卵巢癌细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法 利用佛波酯（PMA）联合白细胞介素4(IL-4)将人单核细胞系THP1细胞诱导为M2型巨噬细胞，实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、巨噬细胞半乳糖型C型凝集素1(Mgl1)、精氨酸酶1(Arg1)的mRNA表达水平。超速离心法分离M2型巨噬细胞来源的外泌体，通过透射电镜、粒径分析仪和Western blot法分别对分离的外泌体进行鉴定。PKH67标记外泌体后与OVCAR-3细胞共培养，免疫荧光细胞染色检测外泌体被细胞的摄取情况。将外泌体与OVCAR-3细胞共培养后，再经过顺铂（DDP）处理，CCK-8实验检测细胞存活率，流式细胞术和Hoechst 33342染色检测细胞凋亡，Western blot法测定细胞中耐药蛋白P-糖蛋白（ABCB1）、乳腺癌耐药蛋白（ABCG2）的表达变化。结果 经PMA和IL-4诱导的细胞TNF-α、iNOS的mRNA水平下降，Mgl1、Arg1的mRNA水平升高，说明诱导获得M2型巨噬细胞；经鉴定成功分离到M2型巨噬细胞来源的外泌体，且PKH67标记的外泌体可被OVCAR-3细胞摄取；M2型巨噬细胞来源的外泌体与OVCAR-3细胞共培养后，能够增强细胞对DDP的耐药，抑制细胞的凋亡，提高耐药蛋白ABCB1、ABCG2的表达水平。结论 M2型巨噬细胞来源的外泌体能够提高人上皮性卵巢癌细胞存活，抑制癌细胞凋亡并促进耐药蛋白表达，增强癌细胞对DDP的耐药性。
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单位解放军总医院
