农杆菌介导流苏石斛遗传转化体系的建立

作者：黄超群; 王小敏; 苏建睦; 牛俊奇; 李姗姗; 莫昭展^*

来源：玉林师范学院学报, 2018, 39(02): 62-67.

DOI：10.13792/j.cnki.cn45-1300/z.2018.02.012

• 流苏石斛
• 再生体系
• 农杆菌介导
• 遗传转化

以流苏石斛原球茎作为受体材料,通过筛选卡那霉素和羧苄青霉素的工作浓度,同时利用正交试验设计对农杆菌介导的流苏石斛遗传转化条件进行优化.结果表明:(1)卡那霉素浓度为200 mg/L可有效抑制非转化材料的生长,可作为抗性植株植株初步筛选浓度;(2)羧苄青霉素浓度为200 mg/L可完全抑制农杆菌的生长,可作为遗传转化脱菌时的最佳时间.(3)农杆菌介导遗传转化的最佳条件;浸染时间20 min、OD600值为0.8,培养5d、添加乙酰丁香酮AS 50μmol/L时,获得的转化率最高.试验对已经筛选了2个月的抗性原球茎进行PCR鉴定,表明已得到了转化的原球茎,初步证实目的基因已整合到流苏石斛的基因组中.

• 单位
  玉林师范学院