摘要
背景 白细胞介素(interleukin, IL)-32γ在食管癌中活化的自然杀伤(natural killer, NK)细胞中高表达,但尚不清楚NK细胞中IL-32γ的表达水平是否影响其对食管癌细胞的杀伤作用.目的 探讨IL-32γ在食管癌中对NK细胞的抗肿瘤作用的影响.方法 将靶向IL-32γ的sh RNA(sh IL-32γ)转入NK-92细胞后,将sh IL-32γ转染的NK-92细胞分别与食管癌细胞EC9706和TE-1构成共培养体系.收集食管癌细胞EC9706和TE-1,用细胞计数试剂8(cell counting kit-8,CCK-8)测量细胞活性,5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine, EDU)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡, Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X, Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved cysteine-containing aspartate-specific proteases 3, Cleaved caspase 3)、肿瘤坏死因子受体超族成员6(tumor necrosis factor receptor superfamily member 6, FAS)、死亡受体3(death receptor3,DR3)和肿瘤坏死因子受体2(tumornecrosisfactor receptor 2, TNFR2)的表达.结果 敲除NK-92细胞的IL-32γ后,在共培养体系中,EC9706和TE-1细胞的细胞活性均升高(P <0.01), EDU阳性细胞数均增多,细胞凋亡均降低(P<0.01), Bcl-2表达水平增加(P<0.01), Bax、Cleaved caspase 3、FAS、DR3和TNFR2的表达水平均降低(P <0.01).结论 敲降IL-32γ能减弱NK-92细胞的抗食管癌作用,且此作用可能与降低食管癌细胞中死亡受体表达和caspase-3激活有关.
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单位丽水市人民医院; 浙江中医药大学