单个人造血干细胞体外培养体系用于小分子化合物筛选

作者：宋赫楠; 张宇; 丁亚辉; 纪庆; 杨铭; 范斯斌; 张子祥; 袁卫平; 程涛; 高瀛岱

来源：中国实验血液学杂志, 2016, 24(03): 845-851.

DOI：10.7534/j.issn.1009-2137.2016.03.039

• 单细胞
• 造血干细胞
• 小分子
• 化合物筛选

目的:探索一种高效且稳定验证小分子化合物对人造血干细胞(hHSC)调控作用的体系和方法。方法:用流式细胞术结合目前对h HSC表面标记的研究,优化h HSC分选过程,将干细胞培养精确至单个细胞水平,进而研究小分子化合物对细胞干性的影响。用已发表的对人HSC有扩增作用的小分子化合物SR1及UM171处理单个h HSC,14 d后进行细胞表型流式细胞术检测以及细胞涂片观察形态,同时利用CFC和CAFC验证培养后细胞造血功能的变化。结果:多细胞培养中2种小分子化合物及其组合作用与已知研究相符,并由此获得化合物使用浓度。多参数单细胞分选(CD34+CD38-CD45RA-CD90+CD49f+)及体外培养结果与多细胞培养结果一致,细胞形态分析结果与流式细胞术检测结果一致。此外,CFC和CAFC体外造血功能实验中,处理组细胞集落形成能力显著高于对照组(P<0.05)。结论:建立了一个周期短且扩增作用稳定的单个hHSC体外培养体系和验证小分子化合物作用的方法,为小分子化合物筛选建立了可靠的平台并为以后的h HSC扩增研究打下基础。

• 单位
  实验血液学国家重点实验室; 中国医学科学院; 北京协和医学院