幽门螺杆菌napA基因真核表达系统的构建及其在小鼠体内的表达

作者：李毅仁; 徐美华; 余俊龙

来源：湘南学院学报(医学版), 2007, (03): 1-3+7.

DOI：10.16500/j.cnki.1673-498x.2007.03.001

• 幽门螺杆菌
• napA基因
• 基因重组
• 基因表达

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)napA基因真核表达系统,了解其在小鼠肌细胞中的表达情况。方法根据GenBank中HpnapA基因序列(AF227075)和真核表达质粒多克隆位点序列设计引物,以Hp-RNA逆转录产物为模板,扩增HpnapA编码基因,用基因重组技术将目的基因定向克隆到pcDNA3多克隆位点上,转化大肠杆菌,经质粒扩增和DNA测序后,进行小鼠肌肉免疫、目的基因表达水平和抗体水平检测。结果经双酶切、PCR和测序验证,真核表达质粒HpnapA/pcDNA3构建成功。动物实验结果表明:真核重组质粒在小鼠肌细胞内获良好表达,表达产物能刺激机体产生一定效价的抗体。结论成功构建了HpnapA/pcDNA3真核重组表达质粒;用以免疫小鼠,在小鼠肌细胞内获较好表达并具有免疫原性,有用于疫苗研究的潜在价值。

• 单位
  中南大学湘雅医学院