阴离子交换蛋白1在HEK293t细胞中的高效表达与鉴定

作者：席玉慧; 白淑芝; 傅国辉

来源：哈尔滨医科大学学报, 2005, 39(02): 107-110.

DOI：10.3969/j.issn.1000-1905.2005.02.001

• 阴离子交换蛋白1
• 磷酸钙转染
• 蛋白表达
• 6-甲氧基-N-(3-磺丙基)喹啉铵

目的　在人胚肾HEK2 93t(2 93t)细胞高效表达具有阴离子转运活性的阴离子交换蛋白1(AE1)。方法　用传统磷酸钙转染法将质粒pRBG4- AE1转入2 93t细胞,免疫荧光及Westernblotting验证蛋白表达及正常的细胞膜定位后,应用6 - 甲氧基- N- (3- 磺丙基)喹啉铵(SPQ)观察表达的AE1是否具有阴离子转运活性。结果　在2 93t细胞中,显示AE1高效表达。转染pRBG4 - AE1后2 93t细胞相对于正常以及转染空载体对照组的阴离子交换功能明显增强。结论　利用传统磷酸钙转染法,在2 93t可高效表达具有正常跨膜拓扑结构及阴离子转运活性的AE1,为进一步研究其相关功能奠定了基础。

• 单位
  哈尔滨医科大学