利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻OsMADS56基因突变体

作者：杨柳; 李晓峰; 祝万万; 张大兵^*

来源：分子植物育种, 2020, 18(11): 3571-3578.

DOI：10.13271/j.mpb.018.003571

• 水稻(Oryza sativa L.)
• OsMADS56
• MADS-box
• CRISPR/Cas9

OsMADS56是水稻中长日照下的开花抑制基因,与拟南芥中同时影响开花时间和花发育的SOC1同源。为了深入探究OsMADS56基因对水稻开花时间的调控功能,本研究利用反向遗传学的方法通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsMADS56基因设计了2个特异性敲除靶位点,构建了OsMADS56基因敲除载体,并通过农杆菌介导的转化方法成功获得了野生型粳稻9522背景的转基因苗。鉴定结果显示9棵OsMADS56转基因苗中包含了3种纯合突变类型,包括第一个外显子第45号碱基处缺失了一个G碱基、缺失了包含了第一个起始密码子的100个碱基对以及在第5个外显子第322号碱基处插入一个A碱基。通过蛋白序列比对分析,发现这三种类型的突变均造成移码突变和蛋白翻译提前终止引起保守结构域的缺失。本研究获得的水稻OsMADS56基因的三个突变体株系对今后进一步深入研究该基因的功能具有重要意义。

• 单位
  生命科学技术学院; 上海交通大学