HPLC法测定注射用重组人白介素-11中的相关蛋白

作者：陈宇堃; 薛巧如; 梁蔚阳^*

来源：药物分析杂志, 2019, 39(06): 1077-1085.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2019.06.16

• 重组人白介素-11
• 相关蛋白
• 相对分子质量
• 液相色谱-质谱联用
• 高效液相色谱

目的:建立测定注射用重组人白介素-11中相关蛋白的高效液相色谱法,对主要杂质进行鉴别。方法:采用HPLC法分离分析注射用重组人白介素-11相关蛋白,利用Agilent 1200型高效液相色谱仪,使用Sepax Bio-C4色谱柱(300?,250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%三氟醋酸水溶液为流动相A,70%乙腈溶液(含0.075%三氟醋酸)为流动相B,进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长220 nm,柱温40℃;采用UPLC-QTOF法分析重组人白介素-11相关蛋白,使用Waters BEH-C4色谱柱(300?,2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸乙腈溶液为流动相B,进行梯度洗脱,对主要相关蛋白进行鉴定。结果:UPLC-QTOF鉴定了3个主要相关蛋白,杂质1、2和3,相对分子质量分别为5 488.446、4 576.214和14 489.558。建立的HPLC测定相关蛋白方法具有良好的结果,与《中华人民共和国药典》2015年版三部中重组人白介素-11原液的纯度方法(HPLC法)比较,杂质检出能力更强。结论:建立的HPLC法简便,灵敏度高,专属性好,能有效反应药品质量。

• 单位
  广东省食品药品监督管理局; 广东省药品检验所