miRNA-34a反义寡核苷酸对非小细胞肺癌细胞HCC827的影响

作者：任丽坤; 王瑜; 庞世杰; 范立华

来源：中国医师杂志, 2020, 22(02).

• 寡核苷酸类,反义
• miRNA-34a
• 癌,非小细胞肺
• 细胞系,肿瘤

目的探讨miRNA-34a反义寡核苷酸对非小细胞肺癌细胞的影响及分子机制。方法qRT-PCR检测人非小细胞肺癌细胞株HCC827和人正常肺细胞MRC-5中miRNA-34a表达水平。将HCC827细胞分为3组:空白对照组、阴性对照miRNA组(miRNA-NC)、反义寡核苷酸miRNA-34a组(脂质体2000转染反义寡核苷酸miRNA-34a); CCK-8法检测细胞增殖能力,吉姆萨染色检测细胞克隆能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力; RT-PCR和Western blot检测细胞中磷酸酶和紧张素同系物(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K) mRNA和蛋白表达水平。结果 HCC827细胞miRNA-34a相对表达量明显高于人正常肺细胞,差异有统计学意义(P <0. 01)。反义寡核苷酸miRNA-34a组miRNA-34a相对表达量明显低于阴性对照miRNA组与空白对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);阴性对照miRNA组与空白对照组miRNA-34a相对表达量之间差异无统计学意义(P> 0. 05)。培养48、72、96 h时反义寡核苷酸miRNA-34a组HCC827细胞增殖水平明显低于阴性对照miRNA组与空白对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。反义寡核苷酸miRNA-34a组细胞克隆形成率明显低于阴性对照miRNA组、空白对照组,差异有统计学意义(P <0. 01)。反义寡核苷酸miRNA-34a组HCC827细胞迁移和侵袭个数明显低于阴性对照miRNA组和空白对照组,差异有统计学意义(P <0. 01)。反义寡核苷酸miRNA-34a组细胞PTEN mRNA和蛋白相对表达量明显高于阴性对照miRNA组与空白对照组,p-Akt、PI3K mRNA和蛋白相对表达量明显低于阴性对照miRNA组与空白对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论人非小细胞肺癌细胞中miRNA-34a表达水平明显高于人正常肺细胞; miRNA-34a反义寡核苷酸能够抑制人非小细胞肺癌细胞的增殖、克隆、迁移和侵袭,其机制可能与负调控PTEN/p-Akt/PI3K信号通路有关。

• 单位
  邯郸市第二医院