IL-18在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化

作者：彭彦; 王勇; 宋方洲; 王亚平

来源：重庆医科大学学报, 2006, (04): 524-527+531.

DOI：10.3969/j.issn.0253-3626.2006.04.018

• 白介素-18
• 原核
• 表达
• 纯化

目的:研究人IL-18成熟蛋白(mhIL-18)在大肠杆菌中的高效的非包涵体表达以及纯化方案。方法:利用PCR方法扩增出mhIL-18基因,构建融合型表达载体pPTYB1-IL18,转化入大肠杆菌ER2566中,IPTG诱导表达,优化表达条件,超声裂解细胞,采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达,亲和层析后用MTT法检测表达mhIL-18的活性。结果:成功构建载体并转化入ER2566后,经IPTG诱导,表达量可占菌体总蛋白的26%以上,其中80%以上的mhIL-18融合蛋白以可溶、有活性的形式存在。亲和层析后的mhIL-18纯度可达95%,具有显著的IL-18的生物学活性。结论:成功的在大肠杆菌中的高效以非包涵体表达mhIL-18,并具有显著的IL-18的生物学活性。

• 单位
  重庆医科大学