鳖甲煎丸调控lncRNA SNHG5/miRNA-26a-5p/GSK-3β信号轴干预原发性肝癌的作用机制

作者：邵范雷; 陈秋平; 毕倩; 杜冰曌; 刘卫红; 邵明义

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-9.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230730

• 鳖甲煎丸
• 肝癌
• 长链非编码RNA SNHG5 (lncRNA SNHG5)
• 微小RNA-26a-5p (miRNA-26a-5p)
• 糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)

目的：基于长链非编码RNA SNHG5 (long non-coding RNA SNHG5， lncRNA SNHG5) /微小RNA-26a-5p (Micro RNA-26a-5p， miRNA-26a-5p) /糖原合成酶激酶-3β (Glycogen synthase kinase-3β， GSK-3β) 信号轴探究鳖甲煎丸干预原发性肝癌的作用机制。方法：双荧光素酶报告实验验证HepG2细胞内lncRNA SNHG5与miRNA-26a-5p，miRNA-26a-5p与GSK-3β的靶向互作关系。建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型，随机分为模型组，鳖甲煎丸低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)，索拉非尼组(100 mg·kg-1)，每组10只。分别予以生理盐水或药物灌胃28 d，并于不同时间测量裸鼠瘤体积。苏木素-伊红 (haematoxylin-eosin，HE) 染色观察肿瘤组织形态学改变；实时荧光定量聚合酶链式反应 (Real-time quantitative PCR，RT-qPCR) 检测肿瘤组织中lncRNA SNHG5、miRNA-26a-5p、GSK-3β 及β-catenin mRNA的核酸水平差异；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中GSK-3β、β-catenin的蛋白表达水平。结果：与SNHG5-WT(野生型)+miRNA NC(内参)组相比，SNHG5-WT+miRNA-26a-5p mimic(模拟物)组的相对荧光素酶活性显著降低，有意义。与GSK-3β-WT+miRNA NC组相比，GSK-3β-WT+miRNA-26a-5p mimic组的相对荧光素酶活性显著降低，有意义。与模型组对比，鳖甲煎丸低、中、高剂量组裸鼠肿瘤体积显著减小，有意义。与模型组比较，鳖甲煎丸各剂量组裸鼠瘤体组织内细胞排列明显稀疏，部分细胞坏死，且呈浓度依赖性变化。与模型组比较，鳖甲煎丸各剂量组lncRNA SNHG5、GSK-3β及β-catenin的表达量均下降，有意义，miRNA-26a-5p的表达量均显著升高，有意义。与模型组比较，鳖甲煎丸各剂量组的关键蛋白GSK-3β及β-catenin表达量均降低，有意义。结论：鳖甲煎丸可能通过lncRNA SNHG5/miRNA-26a-5p/GSK-3β信号轴，影响肝癌细胞坏死从而发挥抗肿瘤作用，该研究为鳖甲煎丸临床应用提供更多的理论依据。

• 单位
  河南中医药大学