基于LAMP微流控芯片检测蓝氏贾第鞭毛虫方法的建立

作者：于铭川; 杨忠委; 王华然; 师丹阳; 周树青; 尹静; 孙树民^*

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2021, 39(03): 402-405.

• 蓝氏贾第鞭毛虫
• 微流控芯片
• 基于介导等温扩增
• 磷酸丙糖异构酶基因

选择蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)磷酸丙糖异构酶(TPI)基因作为靶基因设计引物,以包含TPI基因序列的人工合成质粒为模板,建立基于介导等温扩增(LAMP)微流控芯片的贾第虫检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性和稳定性进行评价。结果显示,建立的贾第虫LAMP微流控芯片检测方法可在30 min内完成核酸的扩增,检测敏感性可达4.0×10拷贝/μl和0.01 ng核酸/μl。隐孢子虫、旋毛虫、艾美耳球虫、戊肝病毒和粪肠球菌核酸均不能扩增,对贾第虫具有良好的特异性。以不同稀释浓度重组质粒为模板进行稳定性和重复性实验,结果显示核酸浓度与反应时间具有良好的相关性,对阳性粪样的检测结果显示扩增信号。建立了基于LAMP微流控芯片的贾第虫核酸检测方法,该方法操作简单、特异性强。

• 单位
  内蒙古民族大学