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摘要
目的探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)在雌激素诱导破骨细胞凋亡中的可能作用机制。方法用不同浓度雌激素作用体外培养的人破骨细胞,采用Western Blot法检测不同时间点(6、12、24 h)CFTR蛋白水平表达变化,获得最合适浓度及最佳作用时间。在最合适浓度雌激素刺激下加入CFTR抑制剂下调CFTR的表达,用流式技术检测其对破骨细胞凋亡的影响。通过雌激素、雌激素受体阻滞剂处理破骨细胞,采用Western Blot法检测雌激素受体ERα、ERβ、CFTR及凋亡相关蛋白Fas/FasL的表达水平。结果当1×10-7 mol/L雌激素作用24 h时CFTR的表达水平较其他浓度及其他时间点高,加入CFTR抑制剂后可显著下调CFTR的表达水平。加入雌激素后,破骨细胞的凋亡率显著升高,加入抑制剂后,可以逆转凋亡率升高。加入雌激素后,雌激素受体ERα和ERβ的表达水平升高,而且促进CFTR的表达;加入ER阻滞剂后,逆转了雌激素对其受体及CFTR的高表达。加入雌激素诱导后,FasL及Fas蛋白的表达水平升高,加入ER阻滞剂可以逆转雌激素诱导的凋亡相关蛋白表达水平升高。结论雌激素通过雌激素受体上调CFTR的表达进而诱导破骨细胞凋亡。
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