摘要
高度表达的乳酸脱氢酶(LDH)与大多数肿瘤细胞的增殖和不良预后具有密切关系,通过建立LDH抑制剂高通量体外筛选模型,为筛选LDH小分子抑制剂提供快捷方法,为抗肿瘤天然产物的筛选提供一种富有潜力的策略。以丙酮酸钠和还原型烟酰胺腺嘌呤二核甘酸(NADH)为底物,加入适量乳酸脱氢酶,通过检测340 nm波长处吸光度的变化,确定底物与LDH的最适浓度及最适孵育时间,用棉酚作为阳性对照,验证筛选模型的科学性,并计算模型的Z’因子。结果表明,酶反应体系的最佳条件为:以0.422 mmol/L的NADH和0.067 mol/L的丙酮酸钠为底物,1 mg/mL乳酸脱氢酶,孵育25 min;测得该模型的Z’因子为0.88~0.90。试验建立的简单、快速、低成本的乳酸脱氢酶抑制剂筛选方法,为抗肿瘤药物筛选、药食同源食品开发利用提供一定研究基础。
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单位西藏自治区农牧科学院; 西藏农牧学院