摘要

目的建立稳定沉默p21的人肺腺癌H460细胞模型并检测该癌细胞模型凋亡相关指标以探索该癌细胞模型与细胞凋亡及增殖的关系。方法利用pLV-CMV-MCS-EF1-mCherry-T2A-Puro慢病毒载体构建pLV-CMV-MCS-EF1-mCherry-T2A-Puro-shp21重组质粒;将重组质粒和包装质粒共转染工具细胞293T,收集病毒液后感染人肺腺癌H460细胞,构建稳定沉默p21的人肺腺癌H460细胞模型;利用Western blotting技术检测沉默效率和凋亡相关指标Bax及Bcl-2的变化;利用CCK8技术检测细胞增殖情况。结果 Western blotting检测稳定沉默p21的人肺腺癌H460细胞模型构建成功;Western blotting检测该细胞模型凋亡相关指标Bax上调,Bcl-2下调;CCK-8结果显示,该细胞模型细胞增殖能力减弱(P<0.05)。结论成功构建稳定沉默p21的人肺腺癌H460细胞模型,并且该癌细胞模型促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,为进一步研究p21的生物学功能奠定基础。