体外培养瘤胃微生物总DNA的提取与纯化

作者:田晓娟; 张志红; 黄江丽; 黄黄; 张国华; 王东升; 丁建南
来源:江西科学, 2012, 30(1): 44-46,102.
DOI:10.3969/j.issn.1001-3679.2012.01.013

摘要

主要目的是寻找一种能最大限度获取所有类型的瘤胃微生物大片段DNA的提取方法,为后期分子生物学技术研究瘤胃微生物奠定基础。采用液氮冻融+溶菌酶+CTAB和SDS相结合的方法处理瘤胃样品并充分破壁,再采用酚/氯仿/异戊醇抽提、异丙醇沉淀获得DNA粗提物,经过试剂盒纯化后得到瘤胃微生物DNA样品。经特异性引物PCR检测,本方法所提取的DNA包含细菌、古细菌、真菌及原虫四类微生物信息。因此,采用该方法提取的DNA可用于后期实时定量PCR或DGGE等研究。

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