pH和pCO2对抗体五聚甘露糖修饰水平的影响研究

作者：陈孝欢; 孙瑞强

来源：生物化工, 2023, 9(05): 78-85.

• 哺乳动物细胞培养
• pH和pCO2
• 五聚甘露糖
• 完全析因实验设计

研究通过完全析因实验设计方法(cfDoE)，研究了胞外pH(pHe)与pCO2对单克隆抗体(mAbs)五聚甘露糖(Man5)水平的影响。以P<0.05为差异显著性依据，结合因子效应图来看，从培养第8d至结束，pCO2均对Man5比例有显著负影响，而pHe从培养第10d才开始有显著正影响，且影响效果不如pCO2。与此同时，胞内pH(pHi)、细胞周期和关键糖苷酶转录水平检测结果表明，pCO2越高，pHi越低；pCO2与收获时G0/G1期细胞比例显著正相关；N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ(GnTⅠ)、α-甘露糖苷酶Ⅱ(α-ManⅡ)和N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅱ(GnTⅡ)的转录水平无明显变化。由此提示，在高pCO2条件下降低Man5的原因可能有两方面，一方面是适当的细胞质环境酸化，提高了高尔基体中糖基化酶活性，从而促进了糖基的成熟化修饰；另一方面是G0/G1期细胞比例增加，糖基化修饰通量增加，糖基化修饰更充分。

• 单位
  复旦大学; 生命科学学院; 上海药明生物技术有限公司