人参皂苷Rg_(1)通过IRE1-JNK-CHOP通路抑制自噬改善OGD/R诱导的PC12细胞损伤

作者：李雨晴; 魏梁丽; 袁雨琪; 杨子腾; 汪宁; 蔡标; 汪光云^*

来源：中国中药杂志, 2023, 1-13.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20231128.405

• 人参皂苷Rg_(1)(GRg_(1))
• 氧糖剥夺/复氧(OGD/R)
• 内质网应激
• 自噬
• IRE1-JNK-CHOP

探讨人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1，GRg1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen and glucose-deprivation/reoxygenation，OGD/R)损伤大鼠嗜铬细胞瘤(rat adrenal pheochromocytoma，PC12)细胞的保护作用及其作用机制是否与调控肌醇需求酶1(inositol-requiring enzyme 1，IRE1)-c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)-C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein，CHOP)信号通路有关。在PC12细胞中建立OGD/R模型，对PC12细胞随机分组为空白组、模型组、OGD/R+GRg1 (0.1、1、10 μmol·L-1)组，OGD/R+GRg1+雷帕霉素(rapamycin，自噬激动剂)组、OGD/R+GRg1+3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA，自噬抑制剂)组、OGD/R+GRg1+衣霉素(tunicamycin，内质网应激激动剂)组、OGD/R+GRg1+4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid，4-PBA，内质网应激抑制剂)组、OGD/R+GRg1+3，5-二溴水杨醛(3，5-dibromosalicylaldehyde，DBSA，IRE1抑制剂)组。除空白组外，其他组都进行OGD/R处理，即氧糖剥夺6 h再复氧6 h。MTT法检测细胞活力，Hoechst 33342染色检测细胞凋亡情况，MDC法检测细胞自噬体的荧光强度。Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3B、p62和通路相关蛋白IRE1、p-IRE1、JNK、p-JNK、GRP78、CHOP的表达情况。结果显示，与模型组相比，0.1、1、10 μmol·L-1 GRg1剂量依赖性地提高了PC12细胞的活力，降低了自噬蛋白Beclin1、LC3-II和通路相关蛋白p-IRE1、p-JNK、葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)、CHOP表达，降低了细胞凋亡率和MDC荧光强度，同时也增加了p62蛋白表达。而分别干预自噬和内质网应激后，与OGD/R+GRg1(10 μmol·L-1)组相比，OGD/R+GRg1+rapamycin组和OGD/R+GRg1+tunicamycin组细胞凋亡率和MDC荧光强度增加，自噬蛋白Beclin1、LC3-II和通路相关蛋白p-IRE1、p-JNK、GRP78、CHOP表达增加，细胞相对存活率和p62蛋白表达降低。3-MA、4-PBA和DBSA则发挥了相反作用。综上所述，GRg1可能通过IRE1-JNK-CHOP通路抑制自噬而改善OGD/R诱导PC12细胞的损伤。

• 单位
  安徽中医药大学