慢病毒介导的RNA干扰抑制白血病细胞增殖的应用

作者：方金勇; 王雍; 张熠玲; 王志龙; 徐玲玲; 赵铁军^*

来源：浙江师范大学学报(自然科学版), 2019, 42(01): 50-55.

DOI：10.16218/j.issn.1001-5051.2019.01.008

• 慢病毒载体
• RNA干扰
• 成人T细胞白血病
• HBZ
• 细胞增殖

通过慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)技术,沉默成人T细胞白血病(ATL)中关键的病毒基因HBZ,并研究RNA干扰后对白血病细胞增殖的影响.首先根据HBZ基因序列设计RNA干扰片段,构建其慢病毒载体,并将其包装成病毒.然后用HBZ siRNA慢病毒感染白血病细胞株TL-Om1,通过RT-PCR和Western blot检测HBZ基因和蛋白表达情况,MTT技术检测沉默HBZ后TL-Om1细胞的增殖情况,利用RT-PCR检测病毒感染后下游生长相关基因的表达.实验结果表明:利用慢病毒介导的RNA干扰技术能有效降低HBZ的表达,进而抑制了白血病细胞的增殖;沉默HBZ后,细胞内E2F1,PCNA和Myc等下游生长相关基因的表达受到了明显抑制.这将为慢病毒介导的RNA干扰技术应用于临床治疗成人T细胞白血病提供重要的实验依据.

• 单位
  浙江师范大学; 生命科学学院