山羊α-干扰素基因克隆、原核表达及其抗病毒活性研究

作者：徐菁昱; 刘艳芬; 陈绍红; 刘铀^*

来源：西北农业学报, 2023, 32(08): 1151-1158.

• 雷州山羊
• α-干扰素(IFN-α)
• 序列分析
• 原核表达
• 抗病毒活性

为研究雷州山羊α-干扰素基因的遗传变异及重组α-干扰素的抗病毒活性，采用RT-PCR扩增雷州山羊α-干扰素基因，分析其核苷酸序列；采用PCR方法扩增山羊α-干扰素基因成熟肽编码序列，构建原核表达载体pET- mIFN-α,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达；采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组蛋白rG-mIFN-α;通过细胞病变抑制法测定其抗小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GPV)活性。结果表明，雷州山羊α-干扰素全基因由570个核苷酸组成，编码189个氨基酸；与GenBank上发表的山羊、林麝、弯角大羚羊、黄牛、瘤牛、绵羊、猪、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为99.8%、95.6%、96.8%、94.7%、94.7%、96.8%、81.6%、77.8%和70.0%;氨基酸序列同源性分别为100%、92.6%、94.7%、92.1%、93.2%、93.7%、67.9%、61.6%和55.3%,提示反刍动物α-干扰素基因的核苷酸和氨基酸序列高度保守；rG-IFNα主要以包涵体形式存在，分子质量约32 ku;重组山羊α-干扰素能显著抑制PPRV和GPV感染引起的细胞病变，其抗PPRV和GPV效价分别为1.6×104 U/mg和1.35×104 U/mg。

• 单位
  广东海洋大学