摘要

Wnt/β-catenin信号通路的正常表达是调控正常细胞生长、分化的重要通路,对Wnt/β-catenin信号通路中靶点的研究也是当前肿瘤靶向治疗的热点。本文旨在探究低强度激光(LLLI)通过Wnt/β-catenin信号通路对RKO结直肠癌细胞的影响。利用632.8 nm波长的红外激光照射RKO细胞,应用半定量聚合酶链式反应(RTPCR)法筛选梯度低强度激光对RKO细胞Wnt/β-catenin信号通路中的APC、β-catenin、DVL基因表达的影响。RT-PCR结果显示:15 J/cm2能量密度的低强度激光可以降低RKO细胞中β-catenin基因的表达,可以增强APC及DVL基因的表达,且有随能量密度的递增而递增的趋势,差异有统计学意义。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法及蛋白质印迹(Western blot)法检测15 J/cm2能量密度的低强度激光照射后的RKO细胞相关指标的变化。qRT-PCR结果显示,Wnt5A、LRP5、TCF-4的基因表达均有不同程度的降低,差异有统计学意义。Western blot结果显示,β-catenin蛋白表达的下降相对于空白对照组的差异有统计学意义。qRT-PCR及Western blot的结果表明,15 J/cm2能量密度的低强度激光短时间照射仍能对RKO细胞Wnt/β-catenin信号通路的过度表达起抑制作用。活细胞/死细胞试剂盒染色观察15 J/cm2能量密度的低强度激光照射下,试验组RKO死细胞较对照组多。综上所述,15 J/cm2能量密度的低强度激光照射能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路过度表达以延缓RKO结直肠癌细胞的增殖,有剂量依赖性及时间累积效应,并可能额外激活细胞凋亡途径导致细胞凋亡。本研究可为结直肠癌的治疗提供一种新的思路。

  • 单位
    暨南大学附属广州红十字会医院; 广州市创伤外科研究所