摘要
【目的】探讨RsbV基因缺失对单核细胞增生李斯特菌(LM)毒力的影响。【方法】运用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术扩增出LM-XS5野毒株的RsbV基因缺失片段,然后用同源重组方法构建RsbV基因缺失株;通过肝脾细菌计数、LD50的测定和毒力基因转录水平的检测(qRT-PCR),研究LM野毒株和缺失株在毒力上的差异。【结果】RsbV基因缺失株LD50是野毒株的104倍(P<0.01);缺失株在小白鼠肝和脾内的载菌量均明显减少(P<0.05);实时荧光定量PCR检测结果发现,缺失株4个毒力因子的表达水平均显著低于野毒株(P<0.05);缺失株免疫小白鼠后对野毒株的攻毒具有良好的免疫保护作...
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单位动物科技学院; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 石河子大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所