生理和病理状况对小鼠肝脏SDF2L1基因表达的影响

作者：王晓娟; 朱斌; 常永生

来源：基础医学与临床, 2015, 35(12): 1601-1605.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2015.12.003

• 质粒
• SDF2L1
• 基因
• 表达

目的确定小鼠肝脏SDF2L1基因在不同生理和病理条件下的表达情况,并构建SDF2L表达质粒,为进一步研究SDF2L1基因的功能奠定基础。方法 Real-time PCR确定SDF2L1基因在糖尿病条件下(db/db和ob/ob小鼠分别为糖尿病和肥胖模型小鼠)或不同营养状态的表达情况;设计并合成SDF2L1基因的PCR引物,以野生型C57BL/6J小鼠肝脏c DNA为模板,扩增SDF2L1编码区,PCR产物测序正确后连接到pc DNA4/myc-His表达载体,鉴定插入片段序列正确后,将构建的质粒转染293A细胞,Western blot检测SDF2L1的表达。结果糖尿病条件下或饥饿状态下小鼠肝脏中SDF2L1基因表达明显下调(P<0.01);纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,酶切鉴定结果符合目的条带(666 bp)大小,插入的寡核苷酸序列与野生型SDF2L1基因序列完全相符,表达的融合蛋白大小为26ku。结论 SDF2L1基因可能参与机体糖脂代谢;成功构建SDF2L表达质粒。

• 单位
  医学分子生物学国家重点实验室; 中国医学科学院基础医学研究所; 北京大学; 首都医科大学附属北京世纪坛医院