人类血小板抗原基因分型参考品的制备及鉴定

作者：安群星; 李翠莹; 陈蕤; 陈晓鹏; 穆士杰

来源：中国输血杂志, 2011, (05): 411-413.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2011.05.011

• 人类血小板抗原
• 基因分型
• DNA
• 质控
• 参考品

目的构建22型人类血小板抗原(HPA)基因分型参考品(质控DNA),并对其进行测序鉴定。方法提取人血液基因组DNA,以其为模板,通过特异性引物扩增出各HPA(1a~16a)基因片段,胶回收后克隆至pUCm-T载体,随后转化E.coliDH5α,提取质粒酶切鉴定并测序;再以构建成功的HPA-1a~16a质粒为模板,通过定点突变获得HPA-1b~16bw基因片段,经克隆、转化后,作酶切鉴定并测序。结果获得了HPA-1a~16a、HPA-1b~16bw基因片段,克隆出各型HPA基因分型参考品质粒,其序列与GenBank中公布的数据完全一致。结论各型HPA基因分型参考品质粒的成功构建,解决了基因频率较...

• 单位
  中国人民解放军成都军区总医院; 第四军医大学第一附属医院